Synthese und Analytik von 4´-Hydroxyclomifen als Referenzsubstanz für die Dopinganalytik

Abstract

Die antiestrogene Dopingsubstanz Clomifen kann im Urin nicht in signifikanten Mengen nachgewiesen werden, weil sie im Körper zum Großteil metabolisiert wird. Ausscheidungsstudien weisen auf einen Hauptmetaboliten hin, anhand dessen GC/MS-Daten man von einer metabolischen Hydroxylierung ausgeht. Die genaue Position der Hydroxygruppe im Molekül konnte jedoch noch nicht bestimmt werden. Im Rahmen dieser Diplomarbeit sollte 4´-Hydroxyclomifen synthetisiert und dessen GC/MS-Daten mit denen des gesuchten Metaboliten verglichen werden. Bei Übereinstimmung könnte die synthetisierte Verbindung in Zukunft als Referenzsubstanz für den Clomifen-Nachweis in der Dopinganalytik eingesetzt werden. Die 4´-Hydroxyclomifen-Vorstufe Deschlor-4´-hydroxyclomifen wurde in einer vierstufigen Synthesesequenz, basierend auf dem Aufbau des Alkenrückgrates über eine McMurry-Kupplung, mit 47% Ausbeute hergestellt. Die Chlorierung dieser Vorstufe lieferte ein Gemisch aus der Zielsubstanz und dem Edukt, das massenspektrometrisch charakterisiert und mit dem Metaboliten eines Ausscheidungsversuches verglichen wurde. Es wurde der Beweis erbracht, dass es sich bei 4´-Hydroxyclomifen nicht um den gesuchten Hauptmetaboliten der Dopingsubstanz Clomifen handelt.<br />

According to its ability to alleviate the side effects of anabolic steroids, the antiestrogenic drug Clomiphene is used as doping substance. Due to its metabolism, Clomiphene itself cannot be detected in significant amounts in human urine samples. According to GC/MS-data of excretion studies, there is a main metabolite, which is assumed to be a hydroxy derivative of Clomiphene. However, the exact position of the hydroxy group in the metabolite could not be determined to date. Within the frame of this diploma thesis 4´-Hydroxyclomiphene should be synthesized and its GC/MS-data should be compared to the one of the metabolite occurring in human urine samples. In the case of compliance with the excretion study, this synthetic metabolite could be used as reference substance for the detection of Clomiphene in doping analysis.<br />4´-Deschlorohydroxyclomiphene, the precursor of 4´-Hydroxyclomiphene, could be obtained in 47% overall yield resulting from a four-step-sequence based on a McMurry coupling reaction. Chlorination of this precursor yielded a mixture of target molecule and reagent, which was characterized via mass spectrometry and compared to the metabolite obtained from excretion studies. It could be proved that 4´-Hydroxyclomiphene is not the main metabolite of clomiphene that is occurring in human urine.